In Vivo Imaging System
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Applications
Tumor Imaging
La línea celular estable de GFP se puede utilizar para confirmar la tumorización. La línea celular estable de GFP creada se puede obtener imágenes in vitro usando FOBI. Las células GFP se inyectan en tejidos subcutáneos e imágenes de fluorescencia como proliferación celular. De esta forma se pueden obtener imágenes de metástasis a otros tejidos, además de cuantificar y comparar el tamaño del tumor.
Con el tiempo, la intensidad de la señal de la fluorescencia cambia y el tiempo de exposición de la cámara puede variar en consecuencia. El programa de análisis de NEOimage puede cuantificar este cambio teniendo en cuenta diferentes condiciones, como el tiempo de exposición y la ganancia; también se pueden comparar y analizar los resultados de muestras con imágenes diferentes.
Cell Tracking
Se pueden obtener imágenes de células madre o células inmunes con funciones mejoradas para diversos fines dentro del animal para determinar su ubicación y viabilidad. Las células madre y las células inmunes son difíciles de marcar con genes fluorescentes. Por lo tanto, las células se pueden teñir con reactivos fluorescentes de diversas formas.
Las células madre y las células inmunes teñidas con un reactivo fluorescente se pueden poner en un animal usando varios métodos tales como inyección intravenosa, inyección intraperitoneal e inyección subcutánea. Estas células se pueden localizar mediante imágenes de FOBI. Se puede determinar la supervivencia celular mediante análisis cuantitativo.
Plant
FOBI puede obtener imágenes de hojas de plantas etiquetadas con GFP. Es difícil obtener imágenes de las hojas de las plantas debido a la fuerte autofluorescencia de la clorofila. La autofluorescencia de la clorofila se puede eliminar y analizar con GFP utilizando un filtro específico.
La autofluorescencia de la clorofila en sí también se puede utilizar como datos. El grado de actividad de la clorofila puede confirmarse mediante la intensidad de la autofluorescencia. Además, se pueden obtener imágenes a partir de semillas y callos de plantas. Es posible obtener imágenes de fluorescencia con plantas a lo largo de todo su ciclo de vida.
DDS(Drug Delivery System)
Los fármacos o células marcados con fluorescencia pueden determinar la intensidad de la fluorescencia in vitro. Estos datos se pueden utilizar para confirmar si la etiqueta fluorescente es buena o no para la obtención de imágenes In Vivo. Esto se puede utilizar como base para predecir o corregir los resultados de los experimentos in vivo. Este proceso puede evitar errores experimentales. En algunos casos, el experimento in vitro puede ser importante en sí mismo.
Los fármacos confirmados in vitro pueden inyectarse en animales con fines experimentales. Al tomar imágenes a ciertos intervalos, puede verificar el patrón de movimiento y acumulación de la droga en los tejidos vivos del animal.
La imagen del fármaco confirmada In Vivo se puede volver a comprobar Ex Vivo. Debido a que la fluorescencia todavía se expresa incluso después de sacrificar al animal, es posible cuantificar cada tejido por separado. Los datos de Ex Vivo resultantes, junto con los datos de In Vivo, pueden proporcionar una excelente evidencia para un experimento.
Fig. 1. Animal imaging by FOBI
It is possible to apply most fluorescence proteins and fluorescence materials from GFP to ICG using four channels of Blue, Green, Red and NIR. Since more than one fluorescent substance can be imaged, different functions can be observed in one sample. For example, tumor imaging and drug imaging can be performed in the same animal, so targeting and tumorization can be observed simultaneously. You can also merge bright images in order to localization the fluorescence within the animal.
Fig. 2. Fluorescence imaging of various materials and methods
a. Fluorescence labeled chemicals in the Zebrafish. b. GFP cell in the 24well plate. c. Fluorescence labeling test. d. Ex Vivo imaging for drug delivery system. e. GFP expression leaf infected gene by virus vehicle. f. Auto-fluorescence from the chlorophyll. g. Gene expression on the leaf with marker gene. h. Gene transfected seed seperated by GFP imaging.